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本生移液器知識點:移液槍的使用方法有哪些?
對于移液器的使用方法主要哪些,本生(天津)健康科技有限公司供應:移液器吸嘴,ELISA試劑盒,動物血清,全系熒光定量PCR耗材,產(chǎn)品包括:PCR單管、八聯(lián)管、96孔板、384孔板。下面本生小編將詳細闡述下:
量程的調(diào)節(jié):
在調(diào)節(jié)量程時,如果要從大體積調(diào)為小體積,則按照正常的調(diào)節(jié)方法,逆時針旋轉旋鈕即可;但如果要從小體積調(diào)為大體積時,則可先順時針旋轉刻度旋鈕至超過量程的刻度,再回調(diào)至設定體積,這樣可以量取的度。在該過程中,千萬不要將按鈕旋出量程,否則會卡住內(nèi)部機械裝置而損壞了移液槍。
設定容量 :設定所需要的容量時應調(diào)整到大于設定容量值的 1/4 圈,再調(diào)至設定值,這樣可排除機械間隙,使設定量值準確,即先將容量調(diào)節(jié)鈕旋轉超過目的容量值的 1/4 圈,再向下調(diào)至設定值。
槍頭(吸液嘴)的裝配:
在將槍頭(pipette tips)套上移液槍時,很多人會使勁地在槍頭盒子上敲幾下,這是錯誤的做法,因為這樣會導致移液槍的內(nèi)部配件(如彈簧)因敲擊產(chǎn)生的瞬時撞擊力而變得松散,甚至會導致刻度調(diào)節(jié)旋鈕卡住。正確的方法是將移液槍(器)垂直插入槍頭中,稍微用力左右微微轉動即可使其緊密結合。如果是多道(如8道或12道)移液槍,則可以將移液槍的道對準個槍頭,然后傾斜地插入,往前后方向搖動即可卡緊。槍頭卡緊的標志是略為超過O型環(huán),并可以看到連接部分形成清晰的密封圈。
移液的方法:
移液之前,要移液器、槍頭和液體處于相同溫度(如果是從并冰箱里拿出來的話呢?)。吸取液體時,移液器保持豎直狀態(tài),將槍頭插入液面下2-3毫米。在吸液之前,可以先吸放幾次液體以潤濕吸液嘴(尤其是要吸取粘稠或密度與水不同的液體時)。這時可以采取兩種移液方法。
一 是前進移液法。用大拇指將按鈕按下至停點,然后慢慢松開按鈕回原點。接著將按鈕按至停點排出液體,稍停片刻繼續(xù)按按鈕至第二停點吹出殘余的液體。松開按鈕。
二 是反向移液法。此法一般用于轉移高粘液體、生物活性液體、易起泡液體或極微量的液體,其原理就是先吸入多于設置量程的液體,轉移液體的時候不用吹出殘余的液體。先按下按鈕至第二停點,慢慢松開按鈕至原點。接著將按鈕按至停點排出設置好量程的液體,繼續(xù)保持按住按鈕位于停點(千萬別再往下按),取下有殘留液體的槍頭,棄之。
維護保養(yǎng)時的注意事項:
如不使用,要把移液槍的量程調(diào)至值的刻度,使彈簧處于松弛狀態(tài)以保護彈簧。
定期清洗移液槍,可以用肥皂水或60%的異丙醇,再用蒸餾水清洗,自然晾干。
高溫消毒之前,要確保移液器能適應高溫。
校準是可以在20-25度環(huán)境中,通過重復幾次秤量蒸餾水的方法來進行。
使用時要檢查是否有漏液現(xiàn)象。方法時吸取液體后懸空垂直放置幾秒中,看看液面是否下降。如果漏液,原因大致有一下幾方面:
1、槍頭是否匹配;
2、彈簧活塞是否正常;
3、如果是易揮發(fā)的液體(許多有機溶劑都如此),則可能是飽和蒸汽壓的問題。可以先吸放幾次液體,然后再移液。
可調(diào)式自動取液器的操作方法:
用拇指和食指旋轉取液器上部的旋鈕,使數(shù)字窗口出現(xiàn)所需容量體積的數(shù)字,在取液器下端插上一個塑料吸頭,并旋緊以氣密,然后四指并攏握住取液器上部, 用拇指按住柱塞桿頂端的按鈕,向下按到停點,將取液器的吸頭插入待取的溶液中,緩慢松開按鈕,吸上液體,并停留1~2秒鐘(粘性大的溶液可加長停留時間),將吸頭沿器壁滑出容器,用吸水紙擦去吸頭表面可能附著的液體,排液時吸頭接觸傾斜的器壁,先將按鈕按到停點,停留一秒鐘(粘性大的液體要加長停留時間),再按壓到第二停點,吹出吸頭尖部的剩余溶液,如果不便于用手取下吸頭,可按下除吸頭推桿,將吸頭推入廢物缸。
移液器使用注意事項:
(1)吸取液體時一定要緩慢平穩(wěn)地松開拇指,絕不允許突然松開,以防將溶液吸入過快而沖入取液器內(nèi)腐蝕柱塞而造成漏氣。
(2)為獲得較高的精度,吸頭需預先吸取一次樣品溶液,然后再正式移液,因為吸取血清蛋白質(zhì)溶液或有機溶劑時,吸頭內(nèi)壁會殘留一層”液膜”,造成排液量偏小而產(chǎn)生誤差。
(3)濃度和粘度大的液體,會產(chǎn)生誤差,為消除其誤差的補償量,可由試驗確定,補償量可用調(diào)節(jié)旋鈕改變讀數(shù)窗的讀數(shù)來進行設定。
(4)可用分析天平稱量所取純水的重量并進行計算的方法,來校正取液器,1mL 蒸餾水20℃時重0.9982g.
(7)在設置量程時,請注意?旋轉到所需量程?數(shù)字清清楚楚在顯示窗中,?所設量程在移液器量程范圍內(nèi)不要將按鈕旋出量程,否則會卡住機械裝置,損壞了移液器。
(8)移液器嚴禁吸取有強揮發(fā)性、強腐蝕性的液體(如濃酸、濃堿、有機物等)。
(9)嚴禁使用移液器吹打混勻液體。
(10)不要用大量程的移液器移取小體積的液體,以免影響準確度。同時,如果需要移取量程范圍以外較大量的液體,請使用移液管進行操作
3. 吸頭浸入角度和深度:
吸頭浸入角度控制在傾斜20度之內(nèi),保持豎直為佳;吸頭浸入深度建議如下所示:
移液器規(guī)格 吸頭浸入深度
2uL和10 uL 1 mm
20uL和100uL 2-3 mm
200uL和1000 uL 3-6 mm
5000uL和10 mL 6-10 mm
對常溫樣品,吸頭潤洗有助于提高準確性;但是對于高溫或低溫樣品,吸頭潤洗反而降低操作準確性,請使用者特別注意。
微量移液器的使用方法:
一、標準操作
適用的液體:水、緩沖液、稀釋的鹽溶液和酸堿溶液。
1)按到檔,垂直進入液面幾毫米。
2)緩慢松開控制按鈕,否則液體進入吸頭過速會導致液體倒吸人移液器內(nèi)部吸入體積減少。
3)打出液體時貼壁并有一定角度,先按到檔,稍微停頓1s后,待剩余液體聚集后,再按到第二檔將剩余液體全部壓出。
二、黏稠或易揮發(fā)液體的移取
在移取黏稠或易揮發(fā)的液體時,很容易導致體積誤差較大。為了提高移液準確性,建議采取以下方法:
1)移液前先用液體預濕吸頭內(nèi)部,即反復吸打液體幾次使吸頭預濕,吸液或排出液體時多停留幾秒。尤其對于移取體積大的液體(如1000~1),建議將吸頭預濕后再移取。
2)采用反相移液法:吸液時按到第二檔,慢慢松開控制按鈕,打液時按到第二檔,部分液體殘留在吸頭內(nèi)。
三、常見的錯誤操作
1)吸液時,移液器本身傾斜,導致移液不準確(應該垂直吸液,慢吸慢放)。
2)裝配吸頭時,用力過猛,導致吸頭難以脫卸(無需用力過猛,選擇與移液器匹配的吸頭)。
3)平放帶有殘余液體吸頭的移液器(應將移液器掛在移液器架上)。
4)用大量程的移液器移取小體積樣品(應該選擇合適量程范圍的移液器)。
5)直接按到第二檔吸液(應該按照上述標準方法操作)。
6)使用丙酮或強腐蝕性的液體清洗移液器(應該參照正確清洗方法操作)。
可調(diào)式移液器的標準操作程序(SOP)/加樣槍操作規(guī)程
【目的】
規(guī)范儀器設備的操作程序,加樣器的正常狀態(tài)。
【適用范圍】
本實驗室加樣器的操作。
【操作人員】
本實驗室實驗人員。
【操作步驟】
1.設定容量值:轉動加樣器的調(diào)節(jié)旋鈕,反時針方向轉動旋鈕,可提高設定移液量。順時針方向轉動旋鈕,可降低設定移液量。在調(diào)整設定移液量的旋鈕時,不要用力過猛,并應注意使移液器顯示的數(shù)值不超過其可調(diào)范圍。
2.預洗:當裝上一個新吸頭時應預洗吸頭,先吸入一次液體并將之排回原容器中。
3.吸液:
[1] 選擇合適的吸頭安放在移液套筒上,稍加扭轉壓緊吸嘴使之與套筒之間無空氣間隙。
[2] 取液之前,所取液體應在室溫(15℃-25℃)平衡。
[3] 把按鈕壓至停點,垂直握持加樣器,使吸頭浸入液面下2~3 毫米處,然后緩慢平穩(wěn)地松開按鈕,吸入液體,等一秒鐘,然后將吸頭提離液面,貼壁停留2-3秒,使管尖外側的液滴滑落。好象不要再吸,不然會再吸進空氣的。
4.放液:
[1] 將吸頭口貼到容器內(nèi)壁底部并保持100~40°傾斜。
[2] 平穩(wěn)地把按鈕壓到停點,等一秒鐘后再把按鈕壓到第二停點以排出剩余液體。
[3] 壓住按鈕,同時提起加樣器,使吸頭貼容器壁擦過。
[4] 松開按鈕。
[5] 按吸頭彈射器除去吸頭。
5.加樣器吸嘴為一次性使用。
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