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BUNSEN本生資訊——血清熱滅活問題匯總
1、 如何正確熱滅活?
將正常化凍后的血清56℃30分鐘進(jìn)行滅活,期間應(yīng)進(jìn)行多次搖晃使其受熱均勻。
2、為什么血清滅活后產(chǎn)生大量沉淀,有時在底部還會出現(xiàn)膠狀物質(zhì)?
血清滅活后出現(xiàn)的沉淀大多數(shù)是纖維蛋白析出,屬正?,F(xiàn)象,滅活過程多次搖晃使血清受熱均勻可以降低蛋白的析出;
當(dāng)血清在未化凍狀態(tài)時直接置56℃水浴或者滅活過程中局部受熱過高時會產(chǎn)生膠狀沉淀,導(dǎo)致血清無法繼續(xù)正常使用。
3、血清滅活的目的
血清熱滅活目的是為了去除血清中補(bǔ)體等對熱敏感的物質(zhì),但是在胎牛血清中對補(bǔ)體的滅活則明顯沒有必要。即使是在未稀釋的血清中,也未發(fā)現(xiàn)有明顯的溶血現(xiàn)象。多數(shù)實驗室在培養(yǎng)將培養(yǎng)液進(jìn)行預(yù)熱的過程,也對熱敏的補(bǔ)體有滅活的作用。熱滅活另一個目的是為了使支原體失活。
4、什么是滅能?
滅活和滅能是同一個意思,叫法不同。
5、是否所有血清使用新生牛必須滅活?
多數(shù)細(xì)胞培養(yǎng)中血清的熱滅活并不是必要的。很多場合下,熱滅活并不會改善細(xì)胞的生長,卻降低了支持細(xì)胞生長的能力。即使在少數(shù)有促進(jìn)的情況下,其促進(jìn)的比率也是微不足道。另外,血清的熱滅活導(dǎo)致的沉淀常常被認(rèn)為是微生物污染,從而給用戶和供應(yīng)商都帶來不必要的麻煩。因此建議,對血清進(jìn)行滅活的用戶,需要通過試驗來證實其必要性。
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